如何调整细菌截留测试方案？

有些情况下，挑战微生物不一定在整个工艺时间下都能在产品中存活。在挑战试验预处理阶段接近尾声的时候直接用足够浓度的挑战微生物接种产品。有一点很重要，将一个0.45μm阳性对照过滤器与测试过滤器平行运行，以确证微生物的尺寸和存活。

另一个办法是将挑战微生物在静态状态下置于待过滤介质中。将挑战微生物以工艺温度暴露在产品中，并在模拟工艺条件下用产品循环对过滤器进行预处理后，就可在最差条件（压差和流速）下挑战过滤器了。挑战时间应被缩减，以确保在实际暴露、挑战和回收期间挑战微生物存活。0.45μm阳性对照过滤器与测试过滤器平行运行，以确认微生物的存活。

在挑战有杀菌能力的产品时，可考虑测试方法参数的修改，通常可只改变一个工艺变量，例如温度。这种方法不能解决所有可能的工艺／产品／挑战微生物的交互反应，但是可以实现标准挑战微生物的运用。在实际工艺条件下使用产品对过滤器进行预处理后，然后修改工艺参数中的杀菌部分如温度，进行细菌挑战。应使用足够浓度的细菌挑战微生物直接接种产品。

另一种修改的方法在用产品预处理过滤器后，将产品的杀菌成分移除。如调节pH至产品非杀菌的范围，去除或者稀释杀菌成分或使用替代流体。

经修改的配方应在实际产品工艺条件下使用足够浓度的挑战微生物直接接种，杀菌成分应被去除到不干扰挑战微生物的水平。

尽管可能在正常工艺条件下，某种产品对缺陷短波单胞菌有杀灭能力，但其他微生物可能在相同条件下可以生存。另外一种对杀菌性产品进行细菌挑战的方法是使用“自身污染微生物”。自身污染微生物分离自生产环境或产品制剂，被证实可在实际生产工艺条件下在产品制剂中存活。

自有的细菌在产品中应繁殖或保持均衡，以确保它们的生物形态和生理学特性在工艺分离物中有代表性。应使用最小的或最坏情况下的自身微生物。

如果较小的微生物确认在产品中存在，那么这些微生物或某一合适的模式微生物可被用来挑战测试过滤器。例如使用在恶劣条件下生长的皮氏罗尔斯顿菌（Ralstonia pickettii）。通常，这些挑战是在缺陷短波单胞菌挑战之外进行的。